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    COSMOSIL色譜柱的柱長及內徑的選擇原則是什么?

    更新時間:2023-01-22瀏覽:869次

      COSMOSIL色譜柱的柱長及內徑的選擇原則是什么?長度的選擇:柱越長,總柱效越高(n值越大),柱越長,分析時間也越長。250—300mm是普遍的柱長,實驗室一半以上的工作都是采用此規格柱子,一般用來分離l0到50個組份的中等至復雜混合物;500—600mm,要求較高分辨率的應用,—般用來分離大于50個組份或包含有難分離物質的復雜樣品程序升溫分析。
      內徑:柱效率與柱半徑平方成反比,內徑越小柱效越高,但內徑越大,柱容量也增加,允許進樣量就越多。當進樣量超過柱容量時,則因柱內每塊理論板內不能建立真正的平衡,將會導致色譜峰畸變,柱分辨率降低,重現性不好。因此對于復雜樣品需要準確分離,必須使用小內徑柱子。另一方面若樣品中存在具有很不相同濃度組份化合物,為了增加樣品容量就必須使用內徑大的柱子,目前實驗室使用常見的柱子內徑一般是4.6mm。
      分析大分子量化合物選擇大孔徑色譜柱;對于高pH值或者堿性化合物需要選擇高封端或者特殊封端的色譜柱,以改善峰形,延長色譜柱使用壽命等。COSMOSIL色譜柱內徑有2.1、3.0、4.6、10mm可供選擇,不銹鋼材質不易因為磕碰損壞柱管。
      正確使用緩沖鹽的目的是防止緩沖鹽析出,因此正確使用緩沖鹽的方法可歸結為一句話:使用前要過濾,使用后要沖洗。具體方法如下:
      1、等度條件:使用緩沖鹽前和使用后需用過渡流動相以1、0ml/min流速沖洗60min;使用后去除緩沖鹽的另一個方法是用過渡流動相以0、2ml/min流速沖洗色譜柱過夜。
      2、梯度條件:用含有緩沖鹽的流動相跑梯度之前,用與初始流動相組成相同的過渡流動相以1、0ml/min流速沖洗60min,再用該過渡流動相以1、0ml/min沖洗色譜柱120min。含緩沖鹽流動相的梯度設定應盡量平緩,以避免梯度過程中緩沖鹽析出。
      3、緩沖鹽析出的補救方法:
      a、用甲醇/20/80以1、0ml/min流速35攝氏度條件下反向沖洗色譜柱120min
      b、用甲醇/水=20/80以0、2ml/min流速反向沖洗色譜柱過夜。

     

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